過去20年里，雖然基因治療已經在臨床實踐中得到應用，并在多個領域取得了成功，但單基因心血管病的基因治療的進展相對滯后。近期在Mayo Clinic Proceedings期刊發表了一篇名為《State of Gene Therapy for Monogenic Cardiovascular Diseases》的綜述文章，該文主要回顧了基因治療的發展歷史，并介紹了基因沉默、基因置換、直接基因編輯和基因抑制和替換（SupRep）等基因治療方法，以及用于基因傳遞的各種載體形式（尤其是腺相關病毒），還重點舉例說明了針對心肌病、離子通道病和家族性高膽固醇血癥等單基因心血管病的基因治療方法。
接下來小編將詳細介紹基因沉默、基因置換和基因編輯等不同方法在單基因心血管病中的應用。
文章要點
· 三種主要的基因治療方法包括基因沉默、基因置換和基因編輯。
· 腺相關病毒載體可作為基因治療遞送的平臺。
· 有效的心臟靶向載體盡管在該領域有一定進展，但目前仍難以實現。
· 單基因心血管病的基因治療方法可歸納為三大類別：心肌病、離子通道病和家族性高膽固醇血癥。針對這些類別，可根據基因治療方法的發展階段，將其總結和分類為三個階段：“食品藥品監督管理局（FDA）批準”、“臨床前階段”和“實驗性階段”。
單基因心血管病的基因治療
單基因心血管病的基因治療方法可以分為三大類別：心肌病、離子通道病和家族性高膽固醇血癥。這些治療方法的概述根據其發展階段被分類為“FDA批準”，“臨床前階段”，和“實驗性階段”（表1）。此外，基因治療與傳統藥物治療方法的主要優缺點總結在圖1中。
表1 FDA批準、臨床前階段和實驗性階段的基因治療總結
注：DMD：杜氏肌營養不良癥；FH：家族性高膽固醇血癥；ARVC：心律失常性右室心肌病；HCM：肥厚型心肌病；CPVT：兒茶酚胺敏感性多形性室性心動過速；LQT1/LQT2：1型/2型長QT綜合征；NA：無法提供；hATTR：TTR介導的淀粉樣變；TTR：遺傳性轉甲狀腺素；ASO：反義寡核苷酸；LNP：脂質納米顆粒；GRT：基因置換治療；AAV：腺相關病毒；CRISPR：規律成簇的間隔短回文重復；Cas9：CRISPR相關蛋白；AIP：自身抑制肽；ABE：腺嘌呤單堿基編輯系統；IND：尚未經過上市審批，正在進行各階段臨床試驗的新藥；MOA：作用機制，藥物與生物體特定靶點發生相互作用，產生療效的過程；RNAi：RNA干擾；shRNA：短發夾RNA；siRNA：小干擾RNA；SupRep：抑制和替代；UTR：非翻譯區域；GRT：基因置換療法；GST：基因沉默療法。
圖1 基因治療與傳統藥物治療的優缺點
在單基因心血管病中的基因治療方法主要包括基因置換療法（GRT）、基因沉默療法（GST）、基于CRISPR-Cas9的直接基因組編輯以及基因抑制和替換（SupRep）療法（見圖2）。
· GRT是指在產生單倍劑量不足、功能喪失（LOF）變異的情況下引入外源的野生型（WT）基因。
· GST是通過使用反義寡核苷酸或RNA干擾策略（如短干擾RNA，siRNA）來降低突變等位基因的表達。
· 直接基因組編輯指的是利用CRISPR-Cas9或堿基編輯策略，引入靶向DNA切割，從而實現DNA修復。
· 基因抑制和替換（SupRep）療法是通過使用短發夾RNA（shRNA）敲除WT和突變的內源等位基因的表達，然后通過一個shRNA-免疫（shiMM）cDNA生成正常蛋白。
圖2 四種主要基因治療策略及相關遺傳性心臟疾病類型
這些基因治療方法各有優劣，對于每位心血管病患者來說，最合適的治療方法可能不同，另外基因檢測是基因治療的基礎，因此需要綜合考慮基因檢測結果以及基因治療方法的優點和缺點為心血管病患者制定個性化的治療方案。
安智因生物遺傳性心血管病基因檢測項目介紹
對于臨床確診或疑似遺傳性心血管病患者，可選擇安智因遺傳性心血管病相關的基因組合檢測或更全面的全外顯子組檢測（WES），檢出（可能）致病變異不僅可以輔助臨床明確診斷和鑒別診斷，找到患者發病的遺傳病因，并進行高危親屬篩查，鑒別攜帶相同遺傳病因的高危親屬，早預防早治療；還可以指導臨床治療和預后，以及優生優育：
? 家族性高膽固醇血癥基因組合檢測主要檢測23個與家族性高膽固醇血癥及與其臨床表現類似的其他脂質紊亂相關的致病基因；
? 遺傳性心肌病基因組合檢測主要檢測79個與擴張型心肌病、肥厚型心肌病、致心律失常性右室心肌病等遺傳性心肌病及與其臨床表現類似的其他疾病相關的致病基因；
? 遺傳性心律失常基因組合檢測主要檢測58個與長QT綜合征、短QT綜合征、Brugada綜合征、兒茶酚胺敏感性多形性室性心動過速等遺傳性心律失常相關的致病基因；
? 遺傳性心肌病/離子通道病基因組合檢測主要檢測216個與多種遺傳性心肌病/離子通道病及其擬表型（擴張型心肌病、肥厚型心肌病、長QT綜合征、短QT綜合征等）相關的致病基因；
? 全外顯子組基因檢測包括但不限于涉及心血管、腎臟、神經、肌肉、骨骼、內分泌、血液、免疫、皮膚、視力等系統至少12大類3000余種單基因遺傳病相關的致病基因。
除了以上檢測項目，安智因還提供了與遺傳性心血管病相關的其他基因檢測，詳見下表：
參考文獻
Bains S, Giudicessi JR, Odening KE, et.al. State of Gene Therapy for Monogenic Cardiovascular Diseases. Mayo Clin Proc. 2024 Apr;99(4):610-629.
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